(資料圖片僅供參考)
1、1.一般來說,較低的退火溫度可以提高pcr反應的敏感性但特異性較差;而較高的退火溫度則可以提高pcr的特異性但卻降低了擴增效率。
2、通常引物與模板的退火溫度在45-55度。
3、2.優化退火溫度最好的方法是設置一系列對照反應,即通過在低于計算出的引物Tm值2-10度的溫度范圍內,進行退火的一系列平行反應來確定最佳退火溫度。
4、也可以通過touch down pcr來設定退火溫度,得到最佳退火溫度。
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